人25羟基维生素D(25-OH-D)酶联免疫分析(ELISA)-分析方法-资讯-生物在线

人25羟基维生素D(25-OH-D)酶联免疫分析(ELISA)

作者:上海裕平生物科技有限公司 2011-10-22T00:00 (访问量:1650)

25羟基维生素D(25-OH-D)酶联免疫分析(ELISA

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中25羟基维生素D(25-OH-D)含量。上海裕平生物科技公司,高品质ELISA试剂盒供应商,品质卓越,价格实惠,售后完善。欢迎垂询:021-60545848
手机:18721526660-18721505559 提供免费代检测服务。

实验原理:

    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中25羟基维生素D(25-OH-D)水平。用纯化的D(25-OH-D)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入25羟基维生素D(25-OH-D),再与HRP标记的25-OH-D抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的25羟基维生素D(25-OH-D)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中25羟基维生素D(25-OH-D)浓度。

试剂盒组成

试剂盒组成

48孔配置

96孔配置

保存

说明书

1

1

封板膜

2片(48

2片(96

密封袋

1

1

酶标包被板

1×48

1×96

2-8保存

标准品:54nmol/L

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8保存

标准品稀释液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8保存

酶标试剂

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

样品稀释液

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

显色剂A

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

显色剂B

3 ml×1

6 ml×1

2-8保存

终止液

3ml×1

6ml×1

2-8保存

浓缩洗涤液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8保存

样本处理及要求

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBSPH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8的温度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

1.         标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后

上海裕平生物科技有限公司 商家主页

地 址: 上海市杨浦区民京路658弄21号1701

联系人: 崔艳

电 话: 021-60545848

传 真: 021-55123867

Email:yupingbio@126.com

相关咨询

14年春节放假通知 (2014-01-16T12:16 浏览数:7565)

上海裕平节假放假通知 (2012-09-28T11:37 浏览数:7672)

开学促销通知 (2012-09-05T13:48 浏览数:7482)

全国2月份报告法定传染病46.7万余例 死亡1246人 (2012-03-13T00:00 浏览数:6593)

研究建立心房肌细胞钙浓度数学模型 (2012-03-09T00:00 浏览数:6245)

春季阴雨天食物易变质 男子食霉变甘蔗成植物人 (2012-03-06T00:00 浏览数:6862)

重庆研究团队历时18年发现肿瘤耐药性基因 (2012-03-01T00:00 浏览数:5856)

广东紫金丙肝患者已确诊123例 接受规范化治疗 (2012-02-29T00:00 浏览数:5629)

为什么“有害的”免疫基因能够得以保留 (2012-02-28T00:00 浏览数:5892)

海外名校出手“抢人” 中国高校陷“狼来了”窘境? (2012-02-22T00:00 浏览数:5344)

ADVERTISEMENT