什么是类风湿因子（rheumatoid factor）？
RF(类风湿因子)是许多不同抗体的可变混合物；这些抗体中有些结合其他抗体，有些是自身抗体(结合自身抗原的抗体)。
什么是嗜异性抗体？（heterophilic antibodies）
嗜异性抗体可以结合其他抗体。在人类样本中，这些抗体或者是结合人类免疫球蛋白的自身抗体，或者是人类抗动物免疫球蛋白抗体(HAIA)，包括人类抗小鼠抗体(HAMA)。
类风湿因子和嗜异性抗体如何使ELISA结果不准确？
在夹心法ELISA中，匹配的抗体对用于捕获和检测可溶性分析物。当样品中存在分析物时，正常情况可以测量到阳性信号(如图1A所示)。然而，血清和血浆中的干扰因素，如类风湿因子(RF)和嗜异性抗体，会使检测的capture和detection抗体交联，从而导致假阳性信号和不准确的分析物定量(如图1B所示)。交联使得无法区分特异性和非特异性信号，最终导致结果不可靠。如果要消除干扰，通常需要加入额外的样品预处理步骤，例如通过PEG 6000沉淀或免疫球蛋白阻断去除抗体。
为了有效消除类风湿因子和嗜异性抗体所造成的假阳性信号，提高分析结果的可信度，Mabtech推出ELISA PathRF kits，在这种ELISA形式中，detection抗体采用重组的单克隆抗体，并加入专门的RF-block diluent，避免了干扰的风险。(如图1C所示)
Mabtech的ELISA PathRF试剂盒已通过含RF血浆的验证
使用一组不匹配的抗体来确定ELISA中获得的信号是真信号还是假阳性信号。这样一组不匹配的抗体由与完全不同的蛋白质结合的capture和detection抗体组成。这种不匹配的设置不能产生真实的信号。然而，如果获得了信号，这表明样品中的RF因子交联了capture和detection抗体，产生了假阳性信号。
在来自类风湿性关节炎患者的100份血浆样品中，Mabtech使用不匹配的ELISA抗体组观察到高频率的假阳性结果。相比之下，ELISA PathRF没有产生假阳性信号(图2)。
图2. Rheumatoid arthritis患者(n=100)的血浆在不匹配的ELISA(针对不同靶标的不匹配抗体组)或不匹配的ELISA PathRF中进行测量。
订购详情
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货号 |
名称 |
规格 |
检测范围 |
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3420-1HP-DP-1 |
ELISA PathRF: Human IFN-γ |
1 plate |
1-1000 pg/ml |
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3416-1HP-DP-1 |
ELISA PathRF: Human IL-1β |
1 plate |
1-316 pg/ml |
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3460-1HP-DP-1 |
ELISA PathRF: Human IL-6 |
1 plate |
10-3160 pg/ml |
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3560-1HP-DP-1 |
ELISA PathRF: Human IL-8 |
1 plate |
3.16-1000 pg/ml |
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3430-1HP-DP-1 |
ELISA PathRF: Human IL-10 |
1 plate |
3.16-1000 pg/ml |
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3520-1HP-DP-1 |
ELISA PathRF: Human IL-17A |
1 plate |
3.16-1000 pg/ml |
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3512-1HP-DP-1 |
ELISA PathRF: Human TNF-α |
1 plate |
3.16-1000 pg/ml |
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