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1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用/注射供试品组的斑马鱼有明显的肾性水肿和肾小球滤过率明显下降,与正常对照组存在明显的差别。2.本实验说明该供试品对斑马鱼有肾脏毒性。
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经过特异性荧光染色(呈绿色,主要定位于细胞核和线粒体),发生氧化应激反应斑马鱼全身明显比正常斑马鱼绿很多,可以用荧光显微镜下观察到斑马鱼体内的活性氧含量。
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经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗血栓药物组的与模型对照组比较,心脏红细胞明显增多、血管直径明显增大、血流速度明显加快。本实验证实了阿司匹林和二十五味珍珠片具有显著的抗血栓作用。
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免疫毒性指标有3个:(1)应用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼,观察中性粒细胞数量;(2)应用转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼,观察巨噬细胞数量(荧光强度);(3)注射红色荧光微球,巨噬细胞吞噬微球排出体外
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基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测。
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我们评价斑马鱼肝脏毒性有4个指标:1.肝脏面积;2.肝脏变性程度;3. 卵黄囊吸收延迟的发生率(卵黄囊是脂肪,卵黄囊吸收与肝功能密切相关);4. 肝脏病理切片。
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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,免疫调节剂组的T细胞荧光强度与正常对照组相似,并未出现模型对照组T细胞减少的情况。2.本实验证实了异丙肌苷具有增强免疫力的功效。
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