PET4迷你垂直电泳槽
产品名称: PET4迷你垂直电泳槽
英文名称: PET4迷你垂直电泳槽
产品编号: 80211ES05
产品价格: 5855.00
产品产地: Yeasen
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2024-12-10T11:21:51
使用范围: null
规格 | 价格 |
套 | 5855.0 |
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
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- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
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产品描述
翌圣 PET4迷你垂直电泳槽操作手册可运行市场多个品牌的预制胶和手灌胶,最多可4块凝胶同时运行;兼容1-D垂直和2-D双向电泳应用。配件齐全,满足制胶及电泳所有环节,也使得手灌胶变得简便快捷。
该产品标配1.0mm梳子
结构信息
配件 |
示意图 |
说明 |
带固定边条玻璃板 箭头 |
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较高并带固定边条的玻璃板。边条厚度0.75;1.0;1.5 mm 3种。 |
短玻板 箭头 |
较短的平玻璃板。与带固定边条的玻璃板组合成凝胶三明治夹。 |
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凝胶夹组件 |
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凝胶三明治 |
主要是灌好胶的玻璃板。 |
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电泳芯 |
把持凝胶三明治,并提供U型密封垫以及上、下电极和电极连接插头。正极以红色表示,负极以黑色表示。 |
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缓冲液槽与上盖 |
缓冲液槽与上盖闭合以确保电泳正常进行,上盖打开即切断电路。槽与上盖同时兼容其它电泳模块,如:转移电泳、2-D 的第一向电泳、电泳洗脱等等。 |
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灌胶框 |
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无需放置于桌面上,灌胶框本身有水平定位结构,可使带边条玻璃板和短玻璃板在底部对齐,确保其组成凝胶三明治夹。 |
制胶底座 |
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压力杠杆使凝胶组件密封于灌胶垫上,保证凝胶夹组件在灌胶时不漏胶。 |
操作指南
1. 凝胶版准备:
1) 正确放置保证灌胶框水平于操作台上,并打开灌胶框手柄;按所需凝胶厚度选择边条玻璃板,将短玻璃放置其上;带边条玻璃板的标记端向上,将两块玻璃板滑入灌胶框与水平定位结构(红圈)对齐,使短玻璃板一面朝向前方(图1,A);【注】:确认标记方向正确;玻璃板方向错误或者未对齐会造成漏胶。
2) 玻璃板到位后关闭灌胶框手柄,将玻璃板夹紧在灌胶框中,并检查玻璃板底部是否平齐(图1,B);
3) 保持灌胶框手柄关闭,将灌胶框放置于制胶底座的制胶密封垫上。同时将凸轮杠杆压在带边条的玻璃板上(图1,C);
4) 重复上述步骤可制作另一块胶板。
图1 凝胶板准备
2. 灌胶:
不连续聚丙烯酰胺凝胶
1) 预先可将梳子完全放入组合好的凝胶夹中,在梳齿下端1 cm处作标记。用来粗略估计分离胶添加高度;
2) 混合所有试剂来制作分离胶单体溶液。将溶液注入玻璃板之间至标记处。注入溶液时须平稳以防止其与空气混合;立即以水或者异丙醇覆盖溶液表面。注意:如果用水覆盖须小心缓慢平稳加入以防与溶液混合;
3) 放置45 min到 1 h使凝胶聚合(或者根据不同品牌的配胶试剂盒要求,进行判断凝胶情况)。可用双蒸水彻底清洗凝胶表面。不要让醇类物质在胶上超过1小时以防止上部凝胶脱水;
4) 准备浓缩胶单体溶液。注入浓缩胶溶液前用滤纸使分离胶表面干燥;将溶液注入玻璃板之间直至与短玻璃板平齐;在边条之间从上部插入所需的梳子,确认梳子两端突起在边条之间引导,完全插入直至梳子背脊与短玻璃板对齐;
5) 放置30-45 min使浓缩胶聚合(或者根据不同品牌的配胶试剂盒要求,进行判断凝胶情况);
6) 轻轻取出梳子并以蒸馏水或缓冲液彻底清洗凝胶表面。以蒸馏水,去离子水清洗用过的灌胶架和制胶底座。
连续聚丙烯酰胺凝胶
1) 混合所有试剂来制作凝胶单体溶液,将溶液注入玻璃板之间直至与短玻璃板平齐;
2) 在边条之间从上部插入所需的梳子,确认梳子两端突起在边条之间引导。完全插入直至梳子背脊与短玻璃板对齐;
3) 放置45 min到 1 h使凝胶聚合(或者根据不同品牌的配胶试剂盒要求,进行判断凝胶情况);
4) 轻轻取出梳子并以蒸馏水或缓冲液彻底清洗凝胶表面;
5) 以蒸馏水,去离子水清洗用过的夹胶框和制胶架。
3. 电泳模块组装与上样所需材料:
1) 准备洁净干燥的电泳缓冲液槽;电泳芯模块(1个电泳芯模块只能用于1或2块胶,做3或4块胶需要2个模块);电泳缓冲液(1-2块胶700 mL;3-4块胶1,000 mL);
【注】:只运行2块胶时只需使用电极插头的电泳芯。运行4块胶时,电极插头的电泳芯和蘑菇头电泳芯均要使用,每个组件2块胶。
2) 打开灌胶架并放置于干净平整操作台上(图2,A);
3) 将第一块凝胶三明治以短玻璃板朝内侧放置于凝胶支撑架上,凝胶支撑架模铸于组件底部且每侧均有两个。放置第一块胶时须小心确认夹胶框保持平衡状态不会翻倒。在另一侧凝胶支撑架上放置第二块胶,共有两块胶相对中心倾斜;如果运行奇数胶(1或3块胶),则须使用缓冲液挡板(图2,B);
4) 同时将2块胶板向中心捏紧,使胶板紧贴密封条,并且需短玻璃板顶住密封条台阶;然后双手同时向内合拢两侧的边卡,使其锁定到位;边卡会推动胶板使短玻璃板紧贴U型密封条的凹槽,以防止漏液(请确认短玻璃板没有压住密封条台阶)(图2,C);
5) 此时可以用缓冲液清洗样品孔和上样(图2,D),请不要尝试在胶板压住密封条台阶时合拢夹胶框夹。
【注】:只运行1-2块胶时请不要把蘑菇头电泳芯放入电泳仪中,那样做会产生额外的热,影响电泳分离效果。
4. 蛋白上样:
1) 向电泳槽中注入电泳缓冲液,外槽至外玻璃板上沿之下,内槽加满;
2) 样本可在电泳芯被放入电泳仪之前或之后进行;
3) 使用注射器或加样枪将样品加入样品孔中(加样孔体积可参考附件1)。
【注】:加样时应缓慢使样品均匀沉降于样品孔底部。注意不要用针头或加样器头刺破胶孔底部;正极和负极均需注入缓冲液,建议正负极缓冲液的液面等高。
5. 在缓冲液槽中放置电泳模块:
【注】:所需缓冲液体积:2块胶700 mL;4块胶1,000 mL;缓冲液槽具有两个位置可放置两个模块:带插头电泳芯在后,蘑菇头电泳芯在前。
1) 首先把缓冲液槽放置于平整桌面上,使正面(具有2-Gels和4-Gels标记的那一面)朝前。如果方向正确,槽边缘的红色标记应该在右边,黑色标记在左边;
2) 如果只运行2块胶则只需用带插头电泳芯,将其放在后部位置上使得红色(+)极与槽右侧的红色标记相对应;
3) 如需做4块胶,除放入带插头电泳芯外,还要将蘑菇头电泳芯放入前部位置。确认两者的红色(+)极与槽右侧的红色标记相对应。注意,位置和方向的错误会使上盖无法盖合;
4) 在缓冲液槽中加入缓冲液至标记位置。
6. 缓冲液槽装配:
将上盖盖在缓冲液槽上。确认颜色标记的插头与插座相对应,插头、插座的匹配可以使定位准确,上盖上的障碍物可以防止定位错误。注意,缓冲液槽两侧的尖突出部分应该从上盖的狭缝中穿出,以保证上盖的正确闭合。此时用拇指持续用力按压上盖,直到压紧在缓冲液槽上。
7. 电源条件:
1) 将电源插头认准正负极插入电泳仪电源插孔内;
2) 给迷你垂直电泳槽通电开始电泳。恒压200 V是SDS-PAGE和多数native PAGE电泳的推荐条件,可以被用于2块胶和4块胶上,不同应用其优化的电压条件会不同。在200 V电压条件下运行SDS-PAGE 大约需要35 min。
8. 凝胶取出:
1) 电泳完成后关断电源、拔出电源插头;
2) 移开上盖,小心取出电泳芯,倒出电泳缓冲液。为防止缓冲液漏洒,请在打开夹子前倒掉缓冲液;
3) 打开夹子,取出凝胶板;
4) 轻轻分离两块玻璃板,从凝胶板中取出凝胶;
5) 采用胶面向下,将胶与玻璃板浸泡在转移缓冲液中,使凝胶与玻璃板分离;
6) 用蒸馏去离子水清洗PET 4迷你垂直电泳槽的电泳芯、缓冲液槽等.
质量保证
翌圣 PET 4 迷你垂直电泳槽为用户提供为期2年的质量保证。凡由产品的原料及制作工艺造成的产品缺陷,在产品的质量保证期内均负责免费维修或更换。
如有下列情况发生,则产品不在质量保证范围之内:
1. 由不正确的操作引起的损坏;
2. 由非我公司指定维修人员的维修改造引起的损坏;
3. 一般性易损部件,如:铂金丝、玻璃板、橡胶垫等;
4. 使用有机溶剂造成的损坏;
附表1蛋白胶每孔最大上样量
孔数 |
每孔宽度 |
0.75 mm |
1.0 mm |
1.5 mm |
5 |
12.7 mm |
70 μL |
105 μL |
160 μL |
9 |
5.08 mm |
33 μL |
44 μL |
66 μL |
10 |
5.08 mm |
33 μL |
44 μL |
66 μL |
15 |
3.35 mm |
20 μL |
26 μL |
40 μL |
配件表
Ver.CN20230815