FuniCut® PvuI-酶-试剂-生物在线
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
FuniCut® PvuI

FuniCut® PvuI

商家询价

产品名称: FuniCut® PvuI

英文名称: FuniCut® PvuI

产品编号: 15069ES30

产品价格: 165.00

产品产地: Yeasen

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2024-12-10T11:18:52

使用范围: null

规格 价格
30 T 165.0
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
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产品简介 

FuniCut® 系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut® 系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。

 

产品信息

货号

15069ES30

规格

30 T

识别位置

5'-CG AT↓CG-3'

3'-GC↑TAGC-5'

推荐反应条件

1×FuniCut® 缓冲液;37°C孵育

酶活

20 U/μL

失活条件

80℃温育20 min

同裂酶

Ple19I

 

组分信息

组分编号

组分名称

15069ES30

15069-A

FuniCut® PvuI

30 μL

15069-B

10×FuniCut® Buffer

1 mL

15069-C

10×FuniCut® Color Buffer*

1 mL

*10×FuniCut® Color Buffer包括红色和黄色示踪染料,可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut® Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期2年。

 

注意事项

1. 3 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。

2. 本产品仅作科研用途。

3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

使用方法

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作)

组分

质粒DNA

PCR产物

基因组DNA

ddH2O

15 μL

16 μL

30 μL

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

3 μL*

5 μL

底物DNA

2 μL (~1 μg)

10 μL (~0.2 μg)

10 μL (5 μg)

FuniCut® PvuI

1 μL

1 μL

5 μL

Total

20 μL

30 μL

50 μL

*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10×FuniCut® Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验,酶切前需纯化PCR产物。

2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。

3) 37°C孵育15 min(质粒),或15~30 min(PCR产物),或30~60 min(基因组DNA)。

4) 80℃温育20 min即可使酶失活,停止反应(可选)。

5) 如果使用FuniCut® Color Buffer进行酶切反应,得到的产物可直接上样电泳。

2. 双酶切或多酶切

1) 每种内切酶的用量为1 μL,并根据需要适当扩大反应体系。

2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。

3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,以较高的温度进行孵育。

3. 质粒的扩大反应体系

组分

体积(20 μL)

体积(20 μL)

体积(50 μL)*

DNA

1 μg

2 μg

5 μg

10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer

2 μL

2 μL

5 μL

FuniCut® PvuI

1 μL

2 μL

5 μL

Total

20 μL

20 μL

50 μL

*如果总反应体系大于20 μL,可使用水浴、金属浴或沙浴,并增加孵育时间。

4. 不同DNA中的识别位点数

λDNA

ΦX174

pBR322

pUC57

pUC18/19

SV40

M13mp18/19

Adeno2

3

0

1

2

2

0

1

7

5. 甲基化修饰影响

Dam

Dcm

CpG

EcoKI

EcoBI

无影响

无影响

剪切受阻

无影响

无影响

6. 不同反应缓冲液中的活性*

反应缓冲液

FuniCut® Buffer

Thermo Scientific

FastDigest Buffer

NEB

CutSmart® Buffer

Takara

QuickCut™ Buffer

活性

100%

100%

100%

100%

*活性数据来自翌圣生物限制酶标准反应体系下的检测。

 

Ver.CN20240523