FuniCut® PvuI
产品名称: FuniCut® PvuI
英文名称: FuniCut® PvuI
产品编号: 15069ES30
产品价格: 165.00
产品产地: Yeasen
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2024-12-10T11:18:52
使用范围: null
规格 | 价格 |
30 T | 165.0 |
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****5640 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
- 二维码 : 点击查看
产品简介
FuniCut® 系列内切酶是通过基因工程重组技术,可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶,适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut® 系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液,从而简化了酶切反应体系,另外,有良好的酶活冗余度,可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。
产品信息
货号 |
15069ES30 |
规格 |
30 T |
识别位置 |
5'-CG AT↓CG-3' 3'-GC↑TAGC-5' |
推荐反应条件 |
1×FuniCut® 缓冲液;37°C孵育 |
酶活 |
20 U/μL |
失活条件 |
80℃温育20 min |
同裂酶 |
Ple19I |
组分信息
组分编号 |
组分名称 |
15069ES30 |
15069-A |
FuniCut® PvuI |
30 μL |
15069-B |
10×FuniCut® Buffer |
1 mL |
15069-C |
10×FuniCut® Color Buffer* |
1 mL |
*10×FuniCut® Color Buffer包括红色和黄色示踪染料,可将产物直接用于凝胶电泳。FuniCut® Color Buffer的红色染料与2500 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近;黄色染料与10 bp双链DNA片段在1%琼脂糖凝胶中迁移速率接近。
储存条件
-25~-15℃保存,有效期2年。
注意事项
1. 3 h孵育未表现星号活性,延时酶切可能出现星号活性。
2. 本产品仅作科研用途。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
使用方法
1. DNA快速酶切流程
1) 按如下建议的加样顺序配制体系反应液(冰上操作)
组分 |
质粒DNA |
PCR产物 |
基因组DNA |
ddH2O |
15 μL |
16 μL |
30 μL |
10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer |
2 μL |
3 μL* |
5 μL |
底物DNA |
2 μL (~1 μg) |
10 μL (~0.2 μg) |
10 μL (5 μg) |
FuniCut® PvuI |
1 μL |
1 μL |
5 μL |
Total |
20 μL |
30 μL |
50 μL |
*本体系指已纯化后的PCR产物。未纯化的PCR产物具备一定的离子强度,10×FuniCut® Buffer加入量可适当减少至2 μL。若下一步进行克隆等实验,酶切前需纯化PCR产物。
2) 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴。
3) 37°C孵育15 min(质粒),或15~30 min(PCR产物),或30~60 min(基因组DNA)。
4) 80℃温育20 min即可使酶失活,停止反应(可选)。
5) 如果使用FuniCut® Color Buffer进行酶切反应,得到的产物可直接上样电泳。
2. 双酶切或多酶切
1) 每种内切酶的用量为1 μL,并根据需要适当扩大反应体系。
2) 所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。
3) 如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,以较高的温度进行孵育。
3. 质粒的扩大反应体系
组分 |
体积(20 μL) |
体积(20 μL) |
体积(50 μL)* |
DNA |
1 μg |
2 μg |
5 μg |
10×FuniCut® Buffer或10×FuniCut® Color Buffer |
2 μL |
2 μL |
5 μL |
FuniCut® PvuI |
1 μL |
2 μL |
5 μL |
Total |
20 μL |
20 μL |
50 μL |
*如果总反应体系大于20 μL,可使用水浴、金属浴或沙浴,并增加孵育时间。
4. 不同DNA中的识别位点数
λDNA |
ΦX174 |
pBR322 |
pUC57 |
pUC18/19 |
SV40 |
M13mp18/19 |
Adeno2 |
3 |
0 |
1 |
2 |
2 |
0 |
1 |
7 |
5. 甲基化修饰影响
Dam |
Dcm |
CpG |
EcoKI |
EcoBI |
无影响 |
无影响 |
剪切受阻 |
无影响 |
无影响 |
6. 不同反应缓冲液中的活性*
反应缓冲液 |
FuniCut® Buffer |
Thermo Scientific FastDigest Buffer |
NEB CutSmart® Buffer |
Takara QuickCut™ Buffer |
活性 |
100% |
100% |
100% |
100% |
*活性数据来自翌圣生物限制酶标准反应体系下的检测。
Ver.CN20240523